其中可以看出手术侧后爪的缩足阈值较手术前及对侧后爪有***降低,且标准误区间非常小。图4是表1的数据通过曲线图的方式展现。结果显示:大鼠在术后***天即出现手术侧后爪敏感,施加轻微的重量(4g左右)都会引起缩足表现,这说明其痛阈明显降低,对轻微的刺激均呈现抬脚,舔舐后足等痛觉过敏表现。这种表现维持至术后至少28天。而对侧后爪在术前和术后缩足阈值变化不大,基本保持在20-25g。实施例3、模型的应用采用实施例1中描述的方法对两组大鼠均进行了造模,l型棒的材料选择的是h62黄铜或聚乳酸等不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天应用重复经颅磁刺激(rtms)***大鼠,其中一组接受了真的磁刺激,为磁刺激组;另一组接受了假的磁刺激,为假刺激组。结果显示,磁刺激组的大鼠缩足阈值较假刺激组明显提高,如图5所示。这表明磁刺激缓解了神经压迫造成的疼痛,该模型可以用于磁刺激***的研究。以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解,本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此。上海东寰告诉您如何选择好的动物模型。扬州C57小鼠疾病动物模型建模
pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。非酒肝疾病动物模型建模供应商找疾病动物模型建模,就找上海东寰。
即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。
f1代小鼠southern印记的5’探针引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印记的目标片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步骤c、采用限制性内切酶bamhi和avrii对dna进行切割;琼脂糖凝胶电泳分离dna;步骤d、将dna转到尼龙膜上;步骤e、探针变性后,与dna分子进行杂交,nbt/bcip化学显色法显色,拍照观察。southern杂交结果如图6所示,可以看到:6、8、9号pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步骤6、将f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子pirb基因敲入小鼠,即为本发明所述小鼠pirb基因敲入的动物模型。将本发明获得的动物模型f2代纯合子小鼠与同品系小鼠组织/细胞特异性cre表达的小鼠杂交,获得f3代小鼠,可以实现在不同组织或者细胞类型中敲入pirb基因。对f3代小鼠进行基因型的鉴定:含有无(pirb-cwt)、一个(pirb-chet)或者两个。便于研究者按实验目的需要随时采取各种样品。
建立肝动物模型的主要方式有二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝4-二甲基氨基偶氮苯(DBA)诱发大鼠肝。用2-乙酰氨基酸(2AAF)诱发大鼠肝。用亚氨基偶氮甲苯(OAAT)诱发大鼠肝。用黄曲霉素诱发大鼠。2、胃:制备胃动物模型的主要方式有①甲基胆蒽(MC)诱发小鼠胃。②不对称亚硝胺诱发小鼠胃。二、消化性溃疡动物模型(animalmodelofpepticulcer)1、应激性溃疡模型是研究抗溃疡药物的常用模型。2、组胺性溃疡模型:大鼠禁食后腹部皮下注射磷酸组胺。此法也可诱发食管、胃、十二指肠等发生溃疡。是研究溃疡发生机制及***药物的常用模型。疾病动物模型建模好做吗?闵行区提供疾病动物模型建模
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得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,l型棒的直径为,端长3-5mm,第二端长1-3mm。具体地,根据大鼠体重选择l型棒的直径大小:当大鼠体重在200g到不足220g范围时,采用直径为;当大鼠体重在220g到不足250g范围时,采用直径为;当大鼠体重在250g到不足300g范围时,采用直径为;当大鼠体重在300g到350g范围时,采用直径为。在另一个具体实施方式中,压迫元件为u型棒;步骤三具体为:将u型棒的***端和第二端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。扬州C57小鼠疾病动物模型建模